HIV-1gp41NHR序列靶点专一性的荧光共振能转移测定

摘要：

目的 确定并利用荧光共振能转移法(FRET)对以HIV-1 gp41 N端七联重复序列(NHR)为靶点的融合抑制剂进行筛选和作用机制研究.方法 FRET采用金属络合物多肽技术设计针对不同结合位点、结合强度可调、涵盖全部NHR序列的靶点和探针,对HIV融合抑制剂进行高通量筛选.由于HIV在进行膜融合时其gp41的N端NHR和C端CHR可形成稳定的六螺旋结构,因此,利用圆二色谱仪对FRET所使用的靶点/探针对的结合强度进行验证,确定对应的靶点/探针对可形成稳定的六螺旋结构;同时,借助细胞活性测试测定抑制剂的活性,验证FRET是否可用于筛选以HIV-1 gp41 NHR为靶点的抑制剂.结果与结论 FRET中使用的靶点/探针均可形成螺旋度较高的六螺旋结构,其中Fe(Env2.0)3/CP2及Fe(Env5.0)3/CP5形成的α螺旋度分别高达89.6%和84.7%.FRET所使用的靶点/探针对专一性强、结合作用强,可用于进行HIV-1融合抑制剂的筛选和机制研究.

关键词：HIV-1包膜蛋白质gp41、HIV融合抑制剂、荧光共振能量转移

所属期刊栏目：37

分类号：R512.91(传染病)

资助基金：国家科技重大专项资助项目2009ZX09301-002;国家自然科学基金资助项目81072581

在线出版日期：2013-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：47-52