基于CHO细胞定点整合技术的新型抗体呈现系统的构建

摘要：

目的 建立一个以CHO定点整合系统为基础的高通量抗体筛选平台,筛选获得抗VEGF高亲和力突变体抗体.方法 设计并构建了基于CHO细胞定点整合系统的通用minibody展示载体,将3株亲和力已知的抗VEGF抗体(A6,A63,A657)和1个抗VEGF轻链抗体库分别呈现在CHO细胞的表面,通过Western印迹、Bia-core3000、流式细胞分析等对该展示系统进行验证和评价,并通过流式细胞分选技术对抗体库进行了细胞筛选.结果 成功实现了抗VEGF抗体在CHO细胞表面的展示,流式细胞分析抗体的亲和力与Biacore测定全抗体亲和力结果一致;通过筛选获得3株抗VEGF高亲和力突变体抗体.结论 建立了基于CHO定点整合技术的新型抗体库展示系统,为抗体的亲和力成熟、分子改造等突变库的构建和筛选提供了新的技术支持.

关键词：抗体库、CHO细胞、展示系统、高通量筛选、抗VEGF特异性抗体

所属期刊栏目：36

分类号：R392.11;Q2

在线出版日期：2012-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：608-612,625