串联MS2衣壳蛋白和MS2特异结合RNA表达载体构建及应用

摘要：

目的 构建体内研究RNA-蛋白相互作用的表达载体.方法 利用MS衣壳蛋白可与MS2结合位点(MS2bs)RNA特异性结合的特点,通过设计特异引物,构建pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,以及表达MEG3非编码RNA的表达载体pcDNA3.0-MEG3VI-12XMS2bs.共转染细胞,进行RNA免疫沉淀,所得RNA进行实时定量PCR分析验证.结果 成功构建了pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,实时定量PCR结果表明,与对照相比能明显富集MEG3V1非编码RNA分子.结论 成功构建了体内研究RNA-蛋白质相互作用的表达载体,为RNA-蛋白相互作用研究提供了新的技术方法.

关键词：MS2衣壳蛋白、RNA-蛋白相互作用、RNA结合蛋白

所属期刊栏目：36

分类号：Q522(核酸)

资助基金：国家重大科学研究计划资助项目2010CB912801;国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2009CB521804;国家自然科学基金资助项目30873008,30870529;北京市自然科学基金资助项目5112029

在线出版日期：2012-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：595-598