利用免疫蛋白质组学鉴定炭疽杆菌蛋白MetK及其免疫原性验证

摘要：

目的 验证免疫蛋白质组中鉴定到的S-腺苷甲硫氨酸MetK蛋白的免疫原性.方法 免疫蛋白质组学的方法鉴定到MetK蛋白,通过PCR方法扩增metK基因全长,然后将其克隆到原核表达载体pET32a中,转化大肠杆菌DH5α,测序正确后提取质粒转入BL21(DE3)中进行诱导表达.再通过Ni-NTA柱纯化MetK蛋白,纯化后的蛋白免疫SPF级的BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,通过多克隆抗体与炭疽芽孢杆菌A16R全菌蛋白Western印迹检测,验证MetK蛋白的免疫原性.结果与结论成功表达了MetK蛋白,制备了其多克隆抗体,为免疫蛋白质组学鉴定到的蛋白点进行验证,也为研究MetK蛋白的生物学功能研究提供了条件.

关键词：免疫蛋白质组学、metK、芽孢杆菌、炭疽、基因表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：36

分类号：R392;R378.7

资助基金：国家自然科学基金资助项目81071322,81125012

在线出版日期：2012-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：115-119