10.3969/j.issn.1674-9960.2012.01.009
TLR5干涉慢病毒颗粒制备及稳定细胞系建立
目的 制备Toll样受体5(TLR5)的慢病毒干涉颗粒,建立稳定下调MyD88的HEK293细胞系.方法 将携带不同特异性干涉序列的DNA片段插入干涉质粒pSicoR中,并制备慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染HEK293细胞,建立稳定细胞系,通过RT-PCR和报告基因分析的方法确定不同干涉序列对TLR5表达的下调及信号通路启动的阻断作用.结果 成功制备携带干涉序列的慢病毒颗粒,并建立稳定感染慢病毒的HEK293细胞系.与对照组相比,感染2325位序列的细胞TLR5 mRNA表达水平下降为0.32,对CBLB502的启动作用下降为0.36.结论 成功制备TLR5的慢病毒干涉颗粒,并建立TLR5稳定下调的细胞系.
Toll样受体5、慢病毒、RNA干涉
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
北京市自然科学基金资助项目7102121
2012-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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