DMRIE-C、Lipofectamine2000和TransMessenger转染HCV RNA效率比较

摘要：

目的 比较和优化DMRIE-C、Lipofectamine2000和TransMessenger 3种转染试剂的转染效率,选择适合建立丙型肝炎病毒(HCV)复制子或感染克隆的转染试剂和条件.方法 将含有萤火虫荧光素酶报告基因的HCV RNA,分别通过上述3种转染试剂转染Huh7和Huh7.5.1细胞系,于转染24 h后裂解细胞,测定荧光素酶活性.2~3周后,结晶紫染色细胞集落.结果 在Huh7和Huh7.5.1细胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的转染效率高.在Huh7细胞中,4 μl DMRIE-C 转染试剂组的荧光素酶活性比其他组高(P＜0.05).在Huh7.5.1细胞中,3 μl DMRIE-C 转染试剂组的荧光素酶活性比其他组高(P＜0.05).在细胞集落形成实验中,DMRIE-C组的细胞克隆数多于其他两种转染试剂组.结论 在Huh7和Huh7.5.1细胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的转染效率高.当建立HCV复制子或感染克隆试验时,既要选择合适的RNA转染试剂,又要考虑细胞生长状态的影响.

关键词：丙型肝炎病毒(HCV)、RNA、荧光素酶类、萤火虫、转染

所属期刊栏目：35

分类号：R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30801414;北京市自然科学基金资助项目7082071

在线出版日期：2011-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：517-520