非编码基因MEG3稳定表达细胞株建立及其对p53转录活性的影响

摘要：

目的 构建人类长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)的真核表达载体,筛选MEG3稳定高表达的肝癌细胞株,分析MEG3过表达对p53转录活性的影响.方法 根据GenBank中MEG3的基因序列设计合成特异引物,从肝癌细胞中扩增MEG3的cDNA序列,将其构建入pcDNA3.0真核表达载体中,得到pcDNA3.0-MEG3表达载体,转染肝癌细胞SK-Hep-1,用G418筛选稳定株,采用RT-PCR技术检测转染细胞中MEG3基因表达,采用荧光素酶报告基因技术分析MEG3过表达细胞中对p53介导的基因转录活性的影响.结果 成功构建了MEG3真核表达质粒pcDNA3.0-MEG3,筛选获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,双荧光报告实验结果显示MEG3过表达能增强p53介导的转录激活作用.结论 本研究获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,为深入分析MEG3的功能及其作用机制奠定了基础.

关键词：RNA、MEG3、基因表达、肝肿瘤、基因、p53、转染、逆转录聚合酶链反应

所属期刊栏目：35

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30870529,30873008;"重大新药创制"科技重大专项资助项目2009ZX090301-002;国家"973"计划项目2010CB912801

在线出版日期：2011-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：424-427