10.3969/j.issn.1674-9960.2010.05.008
重组人sIL-2Rα在HEK293细胞中的分泌性表达与鉴定
目的 在HEK293细胞瞬时表达带有组氨酸标签的重组人sIL-2Rα的胞外功能区片段, 并进行纯化与鉴定.方法 对GenBank中IL-2Rα膜外区基因序列进行优化,并在3′端融合组氨酸标签序列的基因,人工合成该基因并将其克隆到表达载体pL-293;转染HEK293细胞瞬时表达sIL-2Rα;表达产物His标签纯化;SDS-PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定.结果 表达产物中在相对分子质量为48 000处可见与目的 蛋白相对分子质量相符的条带,该条带可被sIL-2Rα单克隆抗体识别.结论 构建的重组sIL-2Rα质粒能够在HEK293细胞瞬时表达,表达量为1~1.5 mg/L.
sIL-2Rα、HEK293、瞬时表达
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R392-33
2010-12-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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