人类流感病毒多重PCR分型方法的建立

摘要：

目的 建立一种可以同时检测人类A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亚型的多重RT-PCR方法.方法 根据人类流感病毒的特异性基因设计并合成多对特异性引物,建立可同时扩增出人类流感病毒亚型特异性片段的多重PCR的方法.同时,对该方法的特异性和敏感性进行了评价,并利用该方法对39份疑似swine H1N1的临床标本进行检测.结果 该方法可同时扩增出A型流感病毒M基因203 bp,B型流感病毒M基因296 bp,A型流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为362 bp(H1),112 bp(H3),188 bp(H5),494 bp(swine H1).该实验最低可检测新甲型H1N1 (A/Beijing/501/2009)病毒RNA 0.5TCID50.该方法的特异性实验结果显示,在多重PCR检测中未检出非特异扩增的PCR产物.同时,使用该方法从39份疑似新甲型H1N1的临床咽拭子标本中检测出新甲型H1N1阳性的标本4份(10.2%),季节性H1N1亚型2份(5.1%),H3N2亚型12份30.7%,本次实验结果与WHO通过实时PCR方法检测的结果一致.结论 本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特异性强,可用于人类流感病毒的分型检测.

关键词：人类流感病毒、病毒分型、多重PCR

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分类号：R373.13(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技重大专项2008ZX10004-001-13

在线出版日期：2010-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：331-333,344