10.3969/j.issn.1674-9960.2010.02.013
MyD88干涉慢病毒颗粒的包装和鉴定
目的 制备MyD88分子的慢病毒干涉颗粒,建立稳定下调MyD88的HEK293细胞系.方法 将携带特异性干涉序列的DNA片段克隆入干涉质粒pSicoR中,并制备携带不同干涉序列的慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染HEK293细胞,建立稳定细胞系,经RT-PCR和报告基因分析方法确定不同干涉序列对MyD88表达的下调及信号通路激活的阻断作用.结果 成功制备携带干涉序列的慢病毒颗粒,并获得稳定感染慢病毒的HEK293细胞系,经鉴定发现感染912位序列的细胞MyD88 mRNA表达水平下调为对照组的28%,对CBLB502的激活作用下降为对照组的24%.结论 成功制备MyD88的慢病毒干涉颗粒,可用于建立MyD88稳定下调的细胞系.
髓样分化相关蛋白、慢病毒、RNA干涉、细胞系、质粒
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
北京市自然科学基金7102121
2010-06-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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