抗大鼠HSP70蛋白单克隆抗体的制备及特性研究

摘要：

目的 制备大鼠HSP70蛋白单克隆抗体并对其性质进行研究.方法 利用PCR技术扩增大鼠全长hsp70,插入表达质粒pET-28a,pMAL-c2x,诱导表达,采用亲和层析纯化融合蛋白;用HIS-HSP70融合蛋白免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备大鼠HSP70单克隆抗体;采用Western印迹和免疫组化方法对抗体性质进行鉴定,ELISA方法确定抗体的表型.结果 亲和层析纯化HIS-HSP70蛋白纯度在97.6%,获得6株可稳定分泌抗HSP70 mAb的杂交瘤细胞系;抗体的亚类均是IgG1 类κ链的.Western印迹结果显示6株单抗均能识别天然的大鼠HSP70蛋白;免疫组化结果显示3株抗体可以识别组织的HSP70蛋白.结论 成功获得6株有活性HSP70单克隆抗体,可以识别HSP70蛋白不同表位,为进一步研究HSP70单克隆抗体在疾病中的作用奠定基础.

关键词：大鼠HSP70、表达、单克隆抗体、抗体亚类

所属期刊栏目：34

分类号：R364.1;R392-33(病理学)

资助基金：国家自然科学基金重点项目30430590;天津市应用基础研究计划面上项目07JCYBJC08900

在线出版日期：2010-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：131-134