人oGPCRs与Gi1α的基因融合及其在昆虫细胞Sf9 的表达

摘要：

目的 获得人孤儿G蛋白偶联受体(oGPCR)与G蛋白α亚基(Gi1α)的融合基因及其表达蛋白.方法 采用RT-PCR法,从人HepG2细胞扩增oGPCR成员GPR45,GPR85,GPR174和Gi1α的完整表达序列,运用重叠延伸PCR法扩增得到人oGPCR成员GPR45, GPR85, GPR174 分别与Gi1α的融合基因,将各融合基因与供体质粒pFASTBac1重组,而后分别转化DH10Bac菌株获得杆状病毒穿梭杆粒,制备重组杆状病毒并感染Sf9细胞,收获融合蛋白,经Western印迹鉴定.结果 得到了上述oGPCR成员的融合基因oGPCRs-Gi1α,并使之在昆虫细胞成功表达,制备了足量的oGPCRs-Gi1α融合蛋白.结论 oGPCR可与Gi1α成功融合,昆虫细胞表达体系是制备融合蛋白的理想手段,为今后深入开展oGPCRs的相关研究提供了保障.

关键词：孤儿G蛋白偶联受体、G蛋白α亚基、融合蛋白、质粒、杆状病毒、表达系统、转染

所属期刊栏目：34

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2010-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：8-11