红色糖多孢菌染色体基因快速失活技术研究及应用

摘要：

目的:研究红色糖多孢菌染色体快速同源重组基因失活技术.方法:以Thio抗性基因(tsr)作为筛选标记,在其上下游分别连接失活目的基因两侧同源片段,利用PEG介导原生质体转化将线性DNA同源片段转入红色糖多孢菌,通过tsr基因两侧同源片段与染色体同时重组,将目的基因敲除或失活.结果:tsr基因两侧同源片段长度与红色糖多孢菌染色体同源重组效率密切相关,同源片段长度在500 bp左右时,线性片段与染色体有效重组率很低,而同源片段长度超过1 000 bp时,可获得有效的基因失活突变菌株.通过这种技术构建的红色糖多孢菌ΔbldD基因突变体,合成红霉素产量显著降低,说明bldD参与红霉素合成基因调控.结论:红色糖多孢菌染色体快速同源重组基因失活技术,对于分析红色糖多孢菌基因功能具有重要作用.

关键词：红色糖多孢菌、同源重组、线性同源片段、bldD

所属期刊栏目：33

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30870069,30670068;安徽省科技攻关项目07010302176;安徽省教育厅自然科学基金重点项目KJ2007A017;安徽大学创新团队和人才基金

在线出版日期：2009-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：365-369