肿瘤-睾丸抗原CT45-5的表达纯化及多克隆抗体的制备

摘要：

目的:原核表达、纯化肿瘤-睾丸抗原CT45-5基因,并制备多克隆抗体,以研究其在Fhit特异的信号通路中的作用.方法:设计出特异针对CT45-5的引物,通过RT-PCR扩增出CT45-5的编码基因,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果:原核表达和纯化了CT45-5,并获得了其多克隆抗体,抗体效价达到1: 12 800,Western印迹结果显示,该抗血清能够特异识别原核及真核细胞表达的CT45-5蛋白.结论:肿瘤-睾丸抗原CT45-5能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究CT45-5的功能奠定了基础.

关键词：肿瘤-睾丸抗原CT45-5、表达纯化、多克隆抗体

所属期刊栏目：33

分类号：R730.51(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目30770651, 30670616, 30370441;国家重点基础研究发展计划项目2005CB522506, 2007CB914604;国家"十一五"支撑项目2006BAI23B02

在线出版日期：2009-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：333-336