红色糖多孢菌A226-SP突变体构建及代谢产物分析

摘要：

目的:构建红色糖多孢菌突变菌株,生物合成酮内酯类抗生素.方法:利用反向PCR技术,扩增红色糖多孢菌KR6酮还原酶基因突变DNA片段SP(KR6酶中Gly1141 Ala1142替换成ScrPro),克隆于pWHM3上构建染色体同源重组质粒pWHM3-SP.通过PEG介导原生质体转化,将pWHM3-SP导入红色糖多孢菌中.经染色体二次重组后,筛选出1株红色糖多孢菌KR6酶突变菌株A226-SP.结果:DNA序列分析表明,A226-SP染色体上编码KR6酶中Gly1141Ala1142序列GGTGCG突变成SerPro编码序列AGCCCT.HPLC-HRMS分析证实A226-SP菌株合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B(DOEB),同时检测到其中间产物C18H34O6,但没有发现红霉素产物.结论:Gly1141 Ala1142位于KR6酮还原酶的重要功能位点,红色糖多孢菌A226-SP突变体可以合成酮内酯类化合物.

关键词：红色糖多孢菌、酮还原酶、同源重组、3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B

所属期刊栏目：33

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30870069,30670068;安徽省科技攻关项目07010302176;安徽省教育厅自然科学重点基金KJ2007A017;安徽大学人才基金

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：224-227