猪α1,3-半乳糖转移酶基因定向缺失质粒的构建

摘要：

目的:构建猪α1,3-半乳糖转移酶(α1,3-galactosyltranferase, GGTA1 /α1,3-GT)基因的定向缺失质粒,用于GGTA1基因敲除.方法:以原代猪胚胎成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFFb)基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因同源长、短臂,将长臂段在NotⅠ位点插入PBSLoxPNEOLoxP质粒中PGK-NEO-PolyA序列的5′端,将短臂段在SalⅠ和XhoⅠ位点插入该质粒PGK-NEO-PolyA序列的3′端.结果和结论:成功构建了猪GGTA1基因的定向缺失质粒NEOSL /GT,为下一步获得GGTA1基因敲除猪打下了基础.

关键词：移植、异种、α1、3-半乳糖转移酶基因、基因打靶、聚合酶链反应

所属期刊栏目：31

分类号：Q617(理论生物物理学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2002CB713804

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：436-439,455