10.3969/j.issn.1674-9960.2007.03.011
利用同源重组建立CHO高表达细胞株
目的:利用同源重组的方法,克服基因组位置效应,建立CHO高表达细胞株.方法:通过弱化筛选基因,构建了一系列弱化筛选基因的载体,大规模筛选CHO基因组,寻找转录活跃区,并在此基础上构建同源重组载体系统,包括标记载体pExplorer和打靶载体pTarget.结果:利用带有弱化筛选基因的标记载体pExplorer寻找到了基础转录水平较高,并且适于加压的细胞克隆,报告基因UK的表达量在加压后稳定在10 μg·ml-1·24 h-1·10-6细胞.然后通过载体pTarget实现了在CHO细胞中的同源重组.结论:通过同源重组的方法,有效地克服了基因组位置效应,为建立哺乳动物高表达细胞株提供了一个新的更加有效的途径.
基因表达、转录活跃区、同源重组、CHO/dhfr-
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划2001AA215351
2007-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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