丙型肝炎病毒核心蛋白激活iNOS表达对DNA的损伤作用研究

摘要：

目的:在转基因小鼠中,研究丙肝病毒(HCV)核心蛋白激活诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达对DNA的损伤作用.方法:携带HCV cDNA的质粒载体pSG-1/HCV显微注射入C57小鼠受精卵.取12月龄小鼠肝组织标本,RT-PCR和Western印迹检测HCV和iNOS的表达水平.尾静脉注射小分子RNA干扰片段作为实验组,PBS作为对照组,对比各组小鼠的iNOS在mRNA和蛋白水平的表达情况及其体内NO的含量.通过连接反应介导的PCR(LM-PCR)方法,评价iNOS和NO水平变化对DNA双链断裂(DSB)的影响. 结果:在转基因小鼠的肝脏中,有HCV和iNOS的特异性高表达,NO含量和DSB水平也远高于未转染HCV基因的正常小鼠.经RNA干扰作用6 d后,实验组小鼠的iNOS表达在mRNA和蛋白水平都有非常明显的下降(P＜0.01);同时NO含量也下降(P＜0.01),DSB现象基本消失.结论:HCV核心蛋白在肝细胞中能激活iNOS的表达,诱导生成NO,进而引发DSB现象,造成对基因组DNA的损伤.RNA干扰可以有效逆转HCV对iNOS基因的激活,对于治疗和预防HCV患者发生的肝癌具有重要意义.

关键词：丙肝病毒、诱导型一氧化氮合成酶、DNA损伤、DNA双链断裂、RNA干扰、基因表达

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分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：537-540