重组肉毒毒素B重链结合区片段的表达、纯化及其抗原性分析

摘要：

目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素B重链结合区C端(BoNT/B Hc)保护性抗原片段.方法:采用PCR扩增BoNT/B Hc基因,插入表达载体pET-His,转化E.coli BL21(pLys)细胞获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/B Hc的抗原性.结果:表达工程菌BL21/pETHis-BHc于37℃经0.2 mmol/L IPTG诱导6 h后,目的蛋白获得高表达,约占菌体总蛋白的24%.经过Ni-NTA亲和层析柱一步纯化,rBoNT/B Hc的纯度可达96%以上.Western印迹和间接ELISA均显示其具有良好的抗原性.结论:成功克隆、表达并纯化了BoNT/B Hc片段,并可被抗天然BoNT/B马血清所识别,为建立快速检测方法和制备相应的抗体及亚单位疫苗奠定了基础.

关键词：肉毒毒素B、克隆、表达、纯化、抗原性

所属期刊栏目：30

分类号：R996.1(毒物学（毒理学）)

资助基金：中国科学院资助项目30370081

在线出版日期：2006-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：127-130