具有多种剪接形式的RNA结合蛋白基因的克隆、表达及其细胞内定位

摘要：

目的:构建具有多种剪接形式的RNA结合蛋白(RBPMS)基因的真核表达载体,并在真核细胞中进行表达,确定RBPMS在细胞中的定位.方法:采用PCR技术,从人卵巢文库中扩增RBPMS基因的完整编码序列,将所扩增基因克隆到带FLAG标签的真核表达载体上,转染人胚肾细胞293T,Western印迹鉴定RBPMS的表达.然后将所扩增基因克隆到带绿色荧光标签的pEGFP-C1表达载体上,转染乳癌细胞ZR75-1,观察RBPMS在细胞中的定位情况.结果:经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确,Western印迹实验证明RBPMS表达成功,通过激光共聚焦显微镜观察,RBPMS分布在胞质中,在40%～50%细胞中RBPMS呈聚集状分布.结论:成功构建了RBPMS基因的真核表达载体,该基因产物分布在胞质中,在40%～50%细胞中RBPMS呈聚集状分布.

关键词：RBPMS、克隆、基因表达、细胞内定位

所属期刊栏目：30

分类号：Q786;R737.9(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30428012,30470378

在线出版日期：2006-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：106-108,112