利用荧光极化技术在均相系统内建立基于Bcl-2/Bak作用模式的高通量药物筛选体系

摘要：

目的:利用荧光极化原理,在液相系统内建立基于Bcl-2/Bak相互作用模式的高通量药物筛选体系.方法:在液相系统内建立Bcl-2蛋白和多肽的相互作用体系,用光度计检测荧光极化值,分析荧光极化值随蛋白或多肽浓度变化而改变的趋势.结果:对应于Bak蛋白BH3结构域的5FAM标记肽(LP)可与Bcl-2蛋白相互作用,建立了二者相互作用的饱和曲线;非标记竞争性短肽(CP)和LP竞争性地与Bcl-2蛋白结合,而无关肽(NP)则不与Bcl-2相互作用;基于Bcl-2结构筛选到的小分子化合物SC对体系内LP荧光极化值的影响模式与CP相同.结论:在均相系统内初步建立了基于抑制Bcl-2活性进而促进细胞凋亡的药物高通量筛选方法,为实现药物的高通量筛选奠定了基础.

关键词：荧光极化、Bcl-2蛋白、Bak蛋白、BH3结构域、饱和曲线

所属期刊栏目：29

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA233041

在线出版日期：2005-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：457-459,470