表达胞壁结合型贝氏柯克斯体27 000外膜蛋白的重组卡介苗构建

摘要：

目的:构建能够表达胞壁结合型贝氏柯克斯体27 000外膜蛋白的重组卡介苗.方法:用PCR技术从卡介苗基因组扩增分枝杆菌19 000抗原的细胞壁结合区基因和从贝氏柯克斯体基因组扩增27 000外膜蛋白基因,将它们分别插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒(pSMT3)的XbaⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/HindⅢ位点.将重组的穿梭质粒转化大肠杆菌并从大肠杆菌提取重组穿梭质粒转化卡介苗. 结果:从含潮霉素的培养基筛选到具有该抗生素抗性的重组卡介苗菌落,用免疫印迹分析重组质粒转化的卡介苗,发现一约27 000的蛋白带与贝氏柯克斯体27 000重组蛋白免疫兔血清发生特异性反应;27 000重组蛋白免疫兔血清做间接免疫荧光检测重组卡介苗,结果为阳性.结论:重组卡介苗能表达贝氏柯克斯体27 000外膜蛋白,表达的27 000外膜蛋白存在于卡介苗菌体表面,卡介苗菌体表面的27 000抗原可能诱导抗Q热免疫应答.

关键词：贝氏柯克斯体、外膜蛋白、卡介苗、穿梭质粒、基因表达

所属期刊栏目：29

分类号：R979.9(药品)

资助基金：国家自然科学基金30271214

在线出版日期：2005-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：60-63