血小板糖蛋白GPⅠbαvWF结合域在酵母中的表达鉴定

摘要：

目的:实现重组糖蛋白GPⅠbα vWF结合域在巴氏毕赤酵母中的表达.方法:PCR从重组质粒pcDNA3.1-GPⅠbα中扩增GPⅠbα vWF结合域基因,以pPIC9k为表达载体,构建包含该目的基因的酵母重组质粒,转染毕赤酵母GS115,以G418筛选抗性克隆,甲醇诱导表达,SDS-PAGE与点印迹鉴定表达产物.结果:获得编码正确的重组质粒pPIC9k-GP302,电转化GS115,以G418筛选到阳性克隆,诱导表达培养上清进行点印迹,结果表明表达蛋白能够与抗GPⅠbα单克隆抗体结合.结论:获得了表达重组蛋白质GPⅠbα vWF结合域的巴氏毕赤酵母菌株以及重组蛋白质GP302.

关键词：巴氏毕赤酵母、基因表达、GPⅠbα、vWF、抗体、单克隆

所属期刊栏目：28

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA216051

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：133-135