人β-防御素3在大肠杆菌中的融合表达及其抗微生物活性的初步分析

摘要：

目的:在大肠杆菌系统中表达有活性的人β-防御素3(hBD3).方法:从pGEM-T-hBD3重组质粒PCR获得hBD3成熟肽编码区基因,插入pGEX-4T-1构建pGEX-4T-1-hBD3融合表达载体,转化E.coli DH5α宿主菌,进行IPTG诱导,诱导菌经超声裂解后获得包涵体,包涵体经溶解、变性、复性和纯化处理后获得GST-hBD3融合蛋白,再经凝血酶切割,获得纯化的重组hBD3(rhBD3).对rhBD3采用最小抑菌浓度测定法测定其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌活性.结果:以与GST融合表达的方式,运用pGEX-4T-1系统在大肠杆菌中表达了hBD3,融合蛋白以包涵体形式存在.融合蛋白经凝血酶处理使rhBD3释放出来,其对金黄色葡萄球菌的MIC为4 μg/ml;对大肠杆菌的MIC为8 μg/ml.结论:采用pGEX-4T-1融合表达系统在大肠杆菌中成功地表达了有活性的rhBD3.

关键词：人β-防御素3、大肠杆菌、融合表达

所属期刊栏目：28

分类号：R632(外科感染)

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：114-116,122