BALB/c小鼠sIL-4受体基因克隆及腺病毒载体的构建

摘要：

目的:克隆小鼠sIL-4R基因并构建sIL-4R基因腺病毒穿梭质粒,将之包装至重组腺病毒颗粒.方法:从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,逆转录为cDNA,应用巢式PCR的方法克隆sIL-4R基因.目的基因经限制性内切酶酶切,定向克隆至腺病毒穿梭载体.利用脂质体将含目的基因的穿梭质粒与腺病毒包装质粒pJM17共同转染腺病毒包装细胞293细胞,PCR方法鉴定重组腺病毒阳性克隆.结果:BALB/c小鼠的sIL-4R cDNA序列与文献报道的小鼠sIL-4R cDNA序列同源性达98%,有9个碱基不匹配,与小鼠IL-4R的同种异型体的膜外区100%同源.293细胞出现特征性细胞病变,PCR鉴定获得重组病毒颗粒.结论:获得了小鼠sIL-4R基因和含sIL-4R基因的腺病毒颗粒,为探讨应用腺病毒介导sIL-4R蛋白治疗过敏性疾病打下了实验基础.

关键词：白细胞介素4受体、腺病毒科、基因、聚合酶链反应、小鼠

所属期刊栏目：28

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：34-36,95