人ω干扰素在巴斯德毕赤酵母中的表达及纯化

摘要：

目的:在巴斯德毕赤酵母中表达及纯化人ω干扰素(interferon ω, IFN-ω)以对其功能进行深入研究.方法:用PCR方法扩增人IFN-ω基因,与分泌型酵母表达载体pMEX9K重组,经酶切、PCR和序列测定证实重组表达载体pMEX9Kω构建正确.将重组载体pMEX9Kω用SalⅠ酶切后,转化毕赤酵母GS115.得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中有人IFN-ω的表达,表达量为4×109 U/L.经过 Butyl Sepharose 4 FF疏水层析柱,SP Sepharose FF离子交换柱和Superdex 75凝胶过滤三步层析纯化,利用反相HPLC分析纯化的重组蛋白.结果:得到了纯度>99% 的重组IFN-ω.N端氨基酸序列测定表明重组人IFN-ω具有正确的N端氨基酸残基顺序,相对分子质量为22 000,并具有同天然蛋白相似的比活性.结论:在毕赤酵母中成功地表达并纯化得到了同天然蛋白具有相似的比活性的人IFN-ω.

关键词：ω干扰素、毕赤酵母、基因表达

所属期刊栏目：27

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2003-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：268-270