10.3969/j.issn.1674-9960.2003.01.008
人突变型TRAIL在大肠杆菌中的表达及诱导多种肿瘤细胞的凋亡
目的:研究突变型肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)的表达及体外诱导多种恶性肿瘤细胞的凋亡作用,为TRAIL临床治疗恶性肿瘤提供实验依据.方法:分段合成TRAIL寡核苷酸,并改变其中90个碱基,然后全长拼接,克隆入原核表达载体pGEX-2T,转化E.coli DH 5α,丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达,亲和层析分离纯化融合蛋白,凝血酶酶切得到TRAIL蛋白.MTT法和流式细胞仪定量分析纯化产物对多种肿瘤细胞的诱导凋亡作用.结果:突变型TRAIL表达产物为可溶性,对人BGC823胃腺癌、A549肺腺癌、H69小细胞肺癌、KB鼻咽癌、A172人脑胶质细胞瘤、SKNSH人成神经细胞瘤株有明显的诱导凋亡作用.结论:原核表达突变型TRAIL具有明显的诱导多种恶性肿瘤细胞凋亡的作用.
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体、肿瘤细胞、细胞凋亡、大肠杆菌
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R73-3(肿瘤学)
国家自然科学基金39928015
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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