LRP16基因启动子的克隆及荧光素酶报道重组子的构建

摘要：

目的:克隆LRP16基因启动子及构建LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.方法:①以LRP16基因全长作为探针,在NCBI的人类基因组数据库中搜索并下载LRP16基因5′端3 kb基因组DNA序列.②以健康献血员基因组DNA为模板进行PCR扩增目的片段,将分离纯化的PCR产物用T4 DNA连接酶与pGEM-T Easy载体相连,转入JM109感受态化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序,进行Kpn Ⅰ和 BamH Ⅰ双酶切和巢式PCR鉴定.③将LRP16启动子-pGEM-T Easy载体再次酶切,纯化回收鉴定过的目的DNA片段,构建LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.结果与结论:长度为2.7 kb的LRP16基因启动子克隆成功,并构建了LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.充分利用因特网上人类基因组数据库的生物信息资源,搜索已知基因的启动子序列,可实现快速、经济和准确地克隆已知基因启动子分子和构建启动子载体的目的.

关键词：LRP16基因、启动子、pGL3-Basic载体、聚合酶链反应

所属期刊栏目：27

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30200095

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：19-21