东部马脑炎病毒E2基因的克隆与表达

摘要：

目的:克隆表达东部马脑炎病毒(eastern equine encephalomyelitis virus,EEEV)E2基因HT5"H 方法:由病毒感染的鼠脑制备总RNA,利用RT_PCREEEV E2?pGEM_T easy载体E2基因克隆至谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX_5x_2中±Western blotting)和ELISA法分HT5"H 结果:经过RT_PCRE2基因片段的序列是正确的,并且在原核载体中得到表达,目的蛋白占总菌体蛋白的24.5%,主要以包涵体形式存在.WesternóGST_E2Triton X_100,1*!mol/L和2*!mol/L尿素E2融合蛋白作为包被抗原初步建立了间接ELISA法,结果表明与兔抗EEEV血清起特异反应,但与兔抗WEEV血清无交叉反应.结论:东方马脑炎病毒的E2基因在大肠杆菌中得到稳定表达,表达的GST_E2EEEV E2μEEEV基因工程诊断试剂奠定了基础.

关键词：东部马脑炎病毒、E2基因、克隆、表达、印迹法、蛋白质、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：26

分类号：R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：105-108