免疫细胞化学中不同固定剂对核蛋白检测效果的影响

摘要：

目的:观察免疫细胞化学中不同固定剂对乳癌易感基因(brca1)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在MCF-7细胞中的亚细胞分布的影响.方法:采用免疫细胞化学的方法,按照ABC试剂盒提供的操作步骤观察用不同固定剂及不同缓冲液时BRCA1和EGF在MCF-7细胞中定位情况.结果:如果细胞用3.7%的甲醛-PBS溶液固定,抗体稀释液及细胞冲洗液皆用PBS,则BRCA1和EGF均着色于细胞浆;若用3.7%的甲醛-PBS溶液固定细胞, 而抗体稀释液及细胞冲洗液更换为含有0.1%吐温20或0.05%TritonX-100的PBS,则BRCA1和EGF均主要着色于细胞核.结果还表明,用纯甲醇、95%乙醇或冰醋酸∶甲醇(1∶3)固定细胞,无论是单用PBS或是含有化学去垢剂的PBS作为抗体稀释液及细胞冲洗液, BRCA1和EGF均主要着色于细胞核.结论:用免疫细胞化学技术检测细胞核蛋白时,最好选用甲醇作为固定剂.如果用甲醛固定细胞,建议用能给核膜打孔的化学去垢剂进一步处理细胞,否则会导致错误结果出现.

关键词：免疫细胞化学、核蛋白、固定剂

所属期刊栏目：25

分类号：R446.6(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金30080010

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：290-292,316