10.3969/j.issn.1674-9960.2001.01.011
抑瘤素M在毕赤酵母中的表达及活性鉴定
目的:构建抑瘤素M (oncostatin M,OSM)的酵母表达体系。方法:将人OSM cDNA连入pPIC9K酵母表达载体,转染毕赤酵母(Pichia pastoris),用MD和MM营养缺陷型培养基筛选具有正确表型的重组转化子,用RNA印迹法和蛋白质印迹法鉴定酵母转化菌株中OSM mRNA转录和OSM相对分子质量。MTT法鉴定OSM蛋白对人黑素瘤细胞生长的抑制活性。结果:构建的毕赤酵母体系可实现人OSM分泌表达,表达量占外分泌蛋白的70%以上。表达蛋白相对分子质量约30 000,对黑素瘤细胞生长可产生明显抑制作用。结论:OSM的酵母分泌表达体系表达量可观,表达蛋白集中于培养液上清,便于纯化,是日后进行OSM大规模制备的可行途径。
抑瘤素M、毕赤酵母、酵母表达体系
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Q592.1
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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