5 L生物反应器中长期灌流培养CHO工程细胞生产rt-PA

摘要：

目的:利用5 L反应器培养CHO工程细胞生产重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator, rt-PA).方法:在5 L搅拌式生物反应器中采用Cytopore1多孔微载体和无血清培基DF5S连续灌流培养CHO工程细胞株4B3.结果:持续培养达103 d,活细胞密度和rt-PA生产水平分别达到6.52×106个细胞/ml和17 161 U/ml.细胞培养上清经Streamline SP离子交换层析和Lysine-Sepharose 4B亲和层析两步纯化,获得纯度达到98%的rt-PA.SDS-PAGE分析表明,整个培养过程所生产的rt-PA具有较好的质量一致性.产品热原检测合格.结论:实现高密度长期培养4B3细胞,确定5 L培养工艺,为进一步扩大生产规模奠定了基础.

关键词：细胞培养、组织型纤溶酶原激活剂、CHO工程细胞、生物反应器

所属期刊栏目：24

分类号：Q813.11(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家科技攻关项目Z18-03-12

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：44-48