H5N1亚型禽流感病毒聚合酶酸性蛋白真核表达载体的构建与表达

摘要：

目的 构建甲型禽流感病毒H5N1亚型聚合酶酸性蛋白(PA)的真核表达载体,并表达其编码蛋白PA.方法 采用RT-PCR法扩增PA基因,克隆至pMD18-T载体中构pMD18-T-PA质粒.双酶切pMD18-T-PA质粒与pXJ40-HA质粒后,胶回收并连接目的片段,构建真核表达载体pXJ40-HA-PA,鉴定后转染293T细胞.采用免疫印迹法(Western blot)鉴定重组PA蛋白的表达.结果 成功构建了禽流感病毒H5N1亚型PA基因的真核表达载体,并在真核细胞中成功表达出分子量为75kD的重组蛋白.结论 成功构建禽流感病毒H5N1亚型PA基因的真核表达载体,为后期进一步研究PA蛋白的功能奠定了基础.

关键词：H5N1禽流感病毒、PA基因、真核表达、克隆

所属期刊栏目：25

分类号：R511.7(传染病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81301448,81302466;国家科技重大专项2012ZX10004-210-004

在线出版日期：2014-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

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