鸡TRAF3基因的克隆表达及多克隆抗体的制备

摘要：

为探究鸡源肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)的生物学功能,对鸡源TRAF3基因进行克隆表达并制备其多克隆抗体.将鸡TRAF3基因分别克隆入原核表达载体pGEX-6P-1和真核表达载体pcDNA3.1中构建出重组原核表达载体pGEX-6P-1-TRAF3和重组真核表达载体pcDNA3.1-TRAF3.构建的原核表达载体转化入大肠埃希菌BL21后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明获得GST-TRAF3的融合表达蛋白,且融合蛋白主要表达于包涵体中.将纯化的GST-TRAF3蛋白免疫小鼠制备抗GST-TRAF3多克隆抗体.间接免疫荧光及Western blot试验表明,所制备的抗TRAF3多克隆抗体不仅能与转染pcDNA3.1-TRAF3的DF-1及LMH细胞中表达的外源性TRAF3反应,而且能有效识别LMH细胞内源性的鸡源TRAF3蛋白.该研究中鸡TRAF3基因的克隆、表达及其多克隆抗体制备为后续研究鸡TRAF3的功能奠定了基础.

关键词：鸡源TRAF3、原核表达、真核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：43

分类号：S831(家禽)

资助基金：国家自然科学基金;江苏高校优势学科建设工程项目

在线出版日期：2022-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：45-50