重组鸭α-干扰素的抗病毒活性

摘要：

本研究参考大肠杆菌密码子的偏好性,对GenBank中已经发表的鸭α-干扰素基因序列进行优化,人工合成后与原核表达载体pET30a-ELP连接,构建原核表达质粒pET30a-DuIFNα-ELP.将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达重组蛋白DuIFNα-ELP.根据类弹性蛋白多肽(ELP)具有温度敏感的可逆相变特性,通过重复可逆相变循环(ITC)纯化重组蛋白质;纯化的蛋白质主要以包涵体的形式存在,通过变性、复性处理后,采用细胞病变抑制法分别在MDCK/VSV和DEF/VSV中检测重组蛋白质的抗病毒活性.结果表明,合成的重组鸭α-干扰素基因能成功表达,重组蛋白DuIFNα-ELP分子质量约80000,纯化后的重组蛋白质纯度约90％.通过抗病毒试验检测重组DuIFNα-ELP在MDCK/VSV系统中的抗病毒活性为1.0×106 U/ml,比活性为1.25×106 U/mg;在DEF/VSV系统中的抗病毒活性为1.0×107 U/ml,比活性为1.25×107 U/mg,比MDCK/VSV系统中活性高10个单位,验证了干扰素的抗病毒活性与受体细胞的应答可能存在一定关系.这一研究结果为鸭α-干扰素防治禽类病毒性疾病的探索奠定了基础.

关键词：鸭、α-干扰素、原核表达、纯化、抗病毒活性

所属期刊栏目：35

分类号：S858.32;S859.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省高等学校自然科学研究重大项目;江苏农牧科技职业学院横向配套课题;2017年省高校协同创新中心立项课题;江苏省农业科技自主创新基金项目[CX181004

在线出版日期：2020-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1402-1406