水稻高盐胁迫下的酵母双杂交文库构建及OsRPK1胞内互作蛋白质的筛选

摘要：

为了挖掘水稻OsRPK1胞内互作蛋白质,阐明OsRPK1参与高盐胁迫的分子机制,本研究利用SMART技术,构建水稻高盐胁迫下根尖的酵母双杂交文库.PCR扩增获得OsRPK1基因编码胞内区域的碱基序列,构建诱饵表达载体(pGBKT7-OsRPK1-CD),检测诱饵表达载体在酵母中的毒性和自激活活性,筛选OsRPK1胞内互作蛋白,进一步分析高盐胁迫下候选基因的表达模式.结果表明,构建的cDNA文库库容量为1.11×107 CFU,文库重组率为96％,文库插入片段多态性较好.成功构建了诱饵表达载体(pGBKT7-OsRPK1-CD),经检测诱饵表达载体无毒性,无自激活活性.诱饵表达载体与cDNA文库进行双杂交筛选,经测序和比对分析获得了11个重要的候选基因,检测候选基因在高盐处理下的表达情况,其中8个候选基因受高盐诱导表达,2个候选基因受高盐胁迫抑制表达,1个候选基因受高盐胁迫瞬时诱导表达后表达量又受到显著抑制.

关键词：水稻、OsRPK1、高盐胁迫、酵母双杂交cDNA文库

所属期刊栏目：35

分类号：Q943.2;S511(植物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31701409;安徽省重点研究和开发计划项目1804a07020111、1804h07020156;安徽省自然科学基金项目1408085MKL63;安徽省农业科学院院长青年创新基金17B0101

在线出版日期：2019-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：753-763