水牛透明带3基因启动子克隆及转录活性检测

摘要：

为了阐明水牛透明带3基因（ ZP3）表达调控机理，通过PCR技术、载体构建和细胞转染等技术，对其转录活性进行了研究。结果表明：成功克隆得到广西本地水牛ZP3基因5′侧翼序列及部分编码区序列（ CDS）区序列，共3081 bp；广西本地水牛ZP3核苷酸序列与河流型水牛、黄牛、绵羊和山羊的相似性分别为99％、96％、92％和92％；在ZP3翻译起始位点上游－147 bp至－196 bp处存在TATA box，启动子区存在GATAs、Foxo3、Nobox、Stat3、Stat4、Stat5a、Stat5b、Stat6和YY1等反式作用因子结合位点，其中Stats家族在ZP3启动子区存在多个结合位点，且同一位点又存在多个Stats结合的情况；水牛ZP3启动子不能启动绿色荧光蛋白（ Enhanced green fluores?cent protein， EGFP）在HEK?293T细胞中的表达，但能启动其在CHO细胞中的表达，且启动子活性比CMV启动子弱。

关键词：水牛、ZP3基因、克隆分析、转录活性

所属期刊栏目：31

分类号：S823.8+3.2(家畜)

资助基金：农业部转基因重点项目2014ZX08010－012B；国际先进技术引进与合作研究开发项目14123001-5

在线出版日期：2016-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1350-1356