10.3969/j.issn.1000-4440.2015.04.017
抗猪瘟病毒单链抗体基因的构建及其推导的蛋白质三级结构的分子模拟
为利用抗猪瘟病毒( Classical swine fever virus,CSFV)单链抗体基因( ScFv)建立CSFV病原快速检测方法,以抗猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增重链可变区基因( VH)和轻链可变区基因( VL),以柔性多肽( Gly4 Ser)3为接头( Linker),经重叠延伸反应将VH、VL基因拼接为完整的CSFV-ScFv基因,并进行克隆、测序分析。结果显示,所克隆单链抗体基因全长732 bp,包括363 bp的VH、45 bp的Linker和324 bp的VL,为VH-Linker-VL结构,编码的氨基酸序列含有明确的互补决定区( CDR)和框架区( FR)以及特征性的半胱氨酸残基,并与多种鼠源单链抗体基因高度同源,具有重组功能性鼠源抗体可变区特征。对CSFV-ScFv基因所编码蛋白质三级结构进行预测,显示其形成口袋样形状的空间构象,理论上具有良好的抗原结合活性。表明本研究成功构建了CSFV-ScFv基因。
猪瘟病毒、单链抗体、序列分析、分子模拟
S852.65+1(动物医学(兽医学))
广西科技攻关与新产品试制项目桂科攻1123007-3
2015-09-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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