10.3969/j.issn.1000-4440.2015.01.017
鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位的串联表达与抗原性分析
在对鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位分析的基础上,将已经筛选出的8条抗原性良好的多肽采用柔性肽拼接,转入T载体中.将酶切回收的串联基因(命名为TEM)克隆于表达载体pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-TEM,将该质粒转化于感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导后进行超声裂解,对融合蛋白进行可溶性分析、Western blotting分析和免疫原性分析.重组质粒pET32a-TEM的酶切和测序结果表明,TEM串联基因已成功插入到pET32a原核表达载体中;表达的pET32a-TEM融合蛋白分子质量约为38 000,以包涵体形式存在.Westernblotting和小鼠免疫试验结果显示,pET32a-TEM融合蛋白与鸭坦布苏病毒阳性血清能发生特异性反应,具有良好的抗原性.串联多肽的成功表达,将为鸭坦布苏病血清学检测方法建立、新型工程疫苗的研发奠定基础.
坦布苏病毒、合成多肽、表达、抗原性
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S858.32(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金项目31172345;江苏省自然科学基金项目BK20130710;江苏省农业科技自主创新基金项目CX125048
2015-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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