人溶菌酶定点突变基因在毕赤酵母中的表达及活性分析

摘要：

利用PCR法将人溶菌酶( hLYZ)成熟肽与载体信号肽连接处的氨基酸残基进行定点突变,突变基因亚克隆至酵母分泌型表达载体pPICZ琢A,重组载体线性化后通过电击转化法转化巴斯德毕赤酵母X-33,利用含Zeo-cine抗生素的YPDS平板筛选高拷贝转化子。转化子酵母经甲醇诱导后取培养基离心上清液进行SDS-PAGE和活性检测。结果显示,突变体hLYZ活力和表达量较野生型均有显著提高。表明定向改变hLYZ信号肽残基性质可以提高其表达量和分泌效率。

关键词：人溶菌酶、巴斯德毕赤酵母、信号肽、定点突变

分类号：Q754(分子遗传学)

资助基金：江苏省科技支撑计划项目BE2013428;南京农业大学青年科技创新基金项目KJ2013030

在线出版日期：2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1396-1401