鹅生长激素基因的克隆、原核表达及其重组蛋白质的离子交换纯化

摘要：

为了克隆鹅生长激素基因并表达其重组蛋白质，采集生长期鹅垂体组织，并利用TRIzo1快速提取的总RNA为模板，反转录为cDNA.根据鹅生长激素基因编码的成熟肽序列(GenBank号：AY149895.2)设计1对引物，分别在上、下游引物的5忆端引入Nhe I和Hind III酶切位点.经反转录扩增获得鹅生长激素基因的编码的成熟肽全序列.通过双酶切和连接将鹅生长激素编码区插入原核表达载体pRSET-A的Nhe I和Hind III位点之间，构建重组表达质粒pRSET-gGH并转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3).转化的菌株经IPTG诱导后表达重组鹅生长激素蛋白质，分子量约为2.93×104.经过DEAE-650M弱阴离子交换树脂纯化获得较高纯度的重组鹅生长激素蛋白质.

关键词：鹅、生长激素、原核表达、阴离子交换

分类号：S835.5(家禽)

资助基金：国家自然科学基金项目31372314;江苏省农业自主创新基金项目CX135039

在线出版日期：2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1387-1391