鹅坦布苏病毒 E蛋白质结构域 I和 II在大肠杆菌中的表达及鉴定

摘要：

为了实现鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域I和II在大肠杆菌中的表达。利用PCR方法扩增得到目的片段，并引入FLAG标签序列(DYKDDDDK)，构建重组表达质粒pET28a-E-I/II。转化至BL21(DE3)中，经IPTG诱导表达目的蛋白质，并对其进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果显示， PCR扩增得到约900 bp的目的片段，经鉴定成功构建重组表达载体pET28a-E-I/II。重组菌在IPTG诱导4 h后在37000处出现目的蛋白质并且表达量达到高峰。经超声波破碎后SDS-PAGE分析显示，融合蛋白质以包涵体形式存在。 Western-blot结果显示，重组蛋白质与FLAG单抗和E蛋白质阳性血清均可发生特异性反应。表明鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域Ⅰ和Ⅱ在大肠杆菌中成功表达，经鉴定重组蛋白质具有良好的免疫反应性。

关键词：鹅坦布苏病毒、E蛋白质、结构域Ⅰ和Ⅱ、大肠杆菌

分类号：S851.34+7.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省自然科学基金项目BK2012376;国家自然科学基金项目31172345;江苏省农业科技自主创新基金项目CX125052

在线出版日期：2014-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：590-594