10.3969/j.issn.1000-4440.2014.03.021
鸡Toll样受体2的克隆表达及多克隆抗体的制备
试验旨在制备鼠抗鸡Toll样受体2(chTLR2)的多克隆抗体。采用RT-PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外区片段chTLR2(chTLR2t1和chTLR2t2),并构建这两个片段的原核表达重组质粒,优化蛋白质的表达条件,SDS-PAGE和Western-blot法检测融合蛋白,将融合蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用相应的原核表达的全长蛋白检测特异性抗体滴度。结果显示,成功获得chTLR2的胞外区片段,构建的原核表达重组质粒经IPTG诱导能成功表达预期的重组蛋白,免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价分别为1:16000和1:10000。表明制备的鼠抗chTLR2多抗具有良好的特异性,为进一步研究chTLR2的功能提供了重要材料。
鸡Toll样受体2、原核表达、多克隆抗体
S831.2(家禽)
江苏省科技支撑计划-农业部分项目BE2012366;江苏畜牧兽医职业技术学院院级项目ZD1103
2014-08-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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