10.3969/j.issn.1000-4440.2014.01.027
SQR基因在Nisin抗性乳酸乳球菌中的表达
为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pLEB590-SQR的构建及其在乳酸乳球菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切载体pLEB590与目的片段SQR,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过电转化法转化到乳酸菌中,提取所得到的乳酸乳球菌质粒pLEB590-SQR进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸乳球菌MG1363中,在含有Nisin(乳酸链球菌素)的选择培养基中筛选阳性克隆,采用SDS-PAGE电泳和Western杂交检测SQR蛋白质的表达情况.最后检测重组质粒在MG1363中的遗传稳定性.结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pLEB590-SQR构建成功,从MG1363中成功检测到目的蛋白质SQR的表达,携带pLEB590-SQR的MG1363遗传稳定性达90%以上.乳酸乳球菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR).
SQR基因、pLEB590、乳酸菌、重组载体
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X512(大气污染及其防治)
江苏省农业科技自主创新基金项目CX10421;农业部转基因生物新品种培育重大专项2013ZX08006-004
2014-03-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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