白花马蹄莲诱导胡萝卜软腐果胶杆菌ubiG基因的克隆与功能分析

摘要：

利用含有无启动子的Km抗性基因的转座子mariner对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)菌株PccS1进行转座诱变,建立突变体文库,以白花马蹄莲组织提取液为诱导物,诱导突变菌株,鉴定突变、并验证.筛选获得1株受白花马蹄莲组织提取液诱导的突变株PM5,经亚克隆鉴定,转座子插入位点为辅酶Q氧甲基转移合成酶ubiG基因(Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase).利用同源重组获得该基因的缺失突变体△ubiG.与野生型相比,△ubiG对不同寄主的致病性均减弱(黄花马蹄莲和白花马蹄莲上的病斑面积减半,大白菜的病斑面积仅为1/5);突变菌株菌体沉降速率明显加快,生物膜产量降低约50％,无胞外蛋白酶产生.此外,△ubiG对链霉素和新霉素抗性分别比野生型增强了2.0倍和26.5倍,突变菌株的相关功能经互补可以部分恢复.以上结果说明,ubiG基因可被白花马蹄莲诱导并参与胡萝卜软腐杆菌的致病作用.

关键词：胡萝卜软腐果胶杆菌、mariner转座子、诱导表达、基因敲除、功能分析

所属期刊栏目：29

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省农业科技支撑计划项目BE2013385;江苏省农业科技自主创新基金项目CX123016

在线出版日期：2014-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1304-1312