猪博卡病毒VP2基因的克隆与原核表达

摘要：

为研究猪博卡病毒VP2蛋白的功能及其在疫病诊断中的作用,对其基因进行了克隆和原核表达.根据猪博卡病毒基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了1对引物,采用PCR方法扩增猪博卡病毒的VP2基因,并将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a-VP2,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达分子量为49 000的融合蛋白,蛋白质表达量较高,且以可溶性形式存在于菌体中.表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好.Westem blot结果显示,表达的VP2蛋白能与His抗体发生特异性免疫反应.说明该试验成功克隆了猪博卡病毒的VP2基因并进行了原核表达,为研究该蛋白的功能及建立血清学诊断方法奠定了基础.

关键词：猪博卡病毒、VP2基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：29

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省农业科技自主创新基金项目CX112060

在线出版日期：2013-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：796-799