粘帚霉GR-6菌株种类鉴定及其β-1,3-葡聚糖酶纯化与酶学性质

摘要：

为明确粘帚霉GR-6产生的β-1,3-葡聚糖酶对植物病原真菌的作用机制,建立β-1,3-葡聚糖酶分离纯化体系,根据形态特征和ITS序列分析鉴定GR-6种类,用60％饱和度的丙酮沉淀酶蛋白质,再通过DE-52离子交换层析和Sephadex G-75凝胶柱层析纯化蛋白质.结果表明,GR-6菌株ITS序列与粉红粘帚霉的相似度最高,达到98％,结合形态学特征将该菌株鉴定为粉红粘帚霉.SDS-PAGE显示纯化后得到一种分子量为4.11×104的蛋白质,该蛋白质具有β-1,3-葡聚糖酶活性.经该酶处理后的水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和棉花黄萎病菌(Verticilliun dahliae)菌丝颜色变浅、细胞轮廓变模糊、甚至菌丝细胞逐渐消失,可见,粉红粘帚霉GR-6产生的β-1,3-葡聚糖酶对这两种植物病原真菌菌丝有直接破坏作用.纯化后的β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4,酶液在50℃以下或pH 5时保存0.5h,酶活性基本保持稳定;该葡聚糖酶对一些金属离子较敏感,其中Zn2+、Sn2+、Ca2+、Fe2+等使酶活性显著降低,而Mn2+和K+对酶活性没有明显的影响.建立的β-1,3-葡聚糖酶纯化体系稳定可靠.

关键词：粉红粘帚霉、β-1、3-葡聚糖酶、分离纯化

所属期刊栏目：29

分类号：S476(各种防治方法)

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目31000875;江苏省高校自然科学基金项目09KJB210005

在线出版日期：2013-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：755-759