大豆GmNAC8基因克隆与原核表达

摘要：

为了进一步明确GmNAC8基因的功能,设计带有NdeⅠ和XbaⅠ双酶切位点引物,从大豆根系cDNA中克隆到GmNAC8基因全长ORF(Open reading frame),编码蛋白质分子质量为37 000,理论等电点为6.43.将扩增片段克隆至原核表达载体pCZN1,构建重组质粒pCZN1-GmNAC8,经过酶切和PCR验证,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,0.2 mmol/L IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳检测获得了目的蛋白质,该蛋白质主要以包涵体的形式存在,通过镍柱子纯化获得纯化蛋白质,然后利用His标签蛋白质作为抗体进行Western-blot分析,证明所纯化蛋白质为目的蛋白质.

关键词：GmNAC8、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：29

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金项目31101166、30971798;江苏省农业科技自主创新基金项目CX125021;江苏省自然科学基金项目BK2010474;国家科技支撑计划项目2011BAD35B06-3-4

在线出版日期：2013-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：734-737