脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化

摘要：

探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法，为筛选出体细胞核移植的供核细胞，制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因，采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导，对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化，荧光显微镜下统计转染后24h的转染效率。结果显示：在24孔培养板中，每孔接种细胞6×104个，24h后进行转染，质粒DNA每孔0.6μg，脂质体与质粒DNA比例为4.5：1.0，脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时，转染效率最高，达到81.2％。

关键词：山羊胎儿成纤维细胞、转染效率、脂质体、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：27

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08008-009B

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：561-565