猪肺炎支原体P36蛋白间接ELISA检测方法的建立

摘要：

将已构建的含有猪肺炎支原体P36基因的酵母表达质粒pPICZα-A-P36在酵母菌X-33里进行表达,并对表达的蛋白进行Western-blotting鉴定.将其作为包被抗原包被酶标板,用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗,并分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化,最终建立了稳定的抗猪肺炎支原体IgG的间接ELISA检测方法.应用该方法检测猪鼻支原体、猪絮状支原体、猪圆环病毒阳性血清等都是阴性,说明该方法具有良好的特异性.批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于8%,说明该方法具有良好的重复性.利用该方法检测猪肺炎支原体活疫苗(168株)免疫猪血清中IgG的动态变化,结果表明,免疫猪血清中的IgG在免疫后分泌逐渐增加,直至免疫后8周,而经强毒攻毒后抗体滴度明显增高.

关键词：猪肺炎支原体、P36蛋白、IgG、间接ELISA

所属期刊栏目：26

分类号：S858.282.4+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业科技成果转化基金项目2009GB2C100129;公益性行业农业科研专项200803020;江苏省农业科技自主创新基金项目CX09118

在线出版日期：2011-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：987-992